114年:(醫檢)檢驗(1)
關於 nested PCR 與 PCR-sequence specific primer（PCR-SSP）的敘述，下列何者最不正確？
APCR-SSP所使用的Taq DNA聚合酶，應不具有3'端至5'端外切酶（exonuclease）活性
Bnested PCR可以降低產物的錯誤率
C臨床上，PCR-SSP常用於多樣性基因的分型
Dnested PCR反應在執行時，需先將RNA反轉錄成cDNA
詳細解析
本題觀念：
探討 nested PCR 與 PCR-sequence specific primer（PCR-SSP）的技術原理與臨床應用，各自的特性與限制。
選項分析
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選項A PCR-SSP所使用的Taq DNA聚合酶，應不具有3′端至5′端外切酶（exonuclease）活性
PCR-SSP（亦稱 allele-specific PCR 或 sequence-specific primer PCR）依賴於引子與模板在3′端完全匹配才得以延伸，若聚合酶具備3′→5′校對（proofreading）活性，則會切除3′端的錯配核苷酸，導致無法放大或降低專一性。常用的 Taq DNA polymerase 即不具3′→5′ exonuclease 活性，才能保證 mismatch primer 無法被剪切、進而提供高特異性(en.wikipedia.org)。此選項陳述正確。 -
選項B nested PCR可以降低產物的錯誤率
nested PCR 透過兩對不同位置的引子、先短循環（first-round）再長循環（secon
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