114年:(醫檢)檢驗(1)

下列何種分析技術組合的串連,最適合用於進行整體蛋白質之分析?

ADNA晶片和二維電泳(2-dimension electrophoresis)
B二維電泳和質譜儀(mass spectrometry)
C氣相層析(gas chromatography)和質譜儀(mass spectrometry)
D蛋白質晶片和二維電泳(2-dimension electrophoresis)

詳細解析

本題觀念:

本題考查整體蛋白質(proteome)分析的典型實驗流程。完整的蛋白質組學(proteomics)研究通常需要先以高解析度分離技術將複雜蛋白質混合物依性質(如等電點、分子量)分別,再運用質譜儀(MS)對分離後的蛋白質進行鑑定與定量。這種「分離—鑑定」的串連策略,能在全蛋白水準進行大規模分析。

選項分析

  • 選項A:DNA晶片和二維電泳
    DNA晶片(DNA microarray)量測的是mRNA表現量,屬於轉錄體(transcriptome)分析,無法直接偵測或鑑定蛋白質;2D電泳雖可分離蛋白質,卻缺乏後續鑑定手段,不能完成蛋白質組學全貌分析。因此此組合不合題意。

  • 選項B:二維電泳和質譜儀
    以等電聚焦(IEF)與SDS-PAGE結合的二維電泳(2-DE)可同時根據等電點和分子量高解析度分離蛋白質,接著將銀染或熒光染後的條帶/點切下,再以質譜儀進行蛋白質鑑定與定量。此為經典的蛋白質組學工作流程,也是現行最廣泛使用的整體蛋白質分析策略 (pnas.org)。

  • 選項C:氣相層析和質譜儀
    GC–MS(氣相層析–質譜)主要用於揮發性或半揮發性小分子(如代謝物、脂質)分析,因為蛋白質體

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