114年:(醫檢)檢驗(1)
關於序列特異性引子－聚合酶連鎖反應（PCR-sequence specific primers, PCR-SSP）檢測HLA等位基因的敘述，下列何者最正確？
A需綜合數個引子的PCR結果判斷是何種等位基因
B每個引子結合到越多種等位基因越好
C適合用來發現新的等位基因
D適合用來解決混型難辨（ambiguity）的問題
詳細解析
本題觀念：
PCR-SSP（Polymerase Chain Reaction–Sequence Specific Primers）是HLA分型中的一種低至中解析度分子技術，透過多對專為既有等位基因序列設計的特異性引子，分別對樣本DNA進行一系列PCR反應，再根據各反應的陽/陰性組合模式推論出HLA等位基因型。
選項分析
- 選項A
PCR-SSP需設計多對不同序列的特異性引子，分別偵測各已知等位基因，經過多個PCR反應後，依據哪幾組引子呈現擴增（陽性）或不擴增（陰性），才能組合出對應的等位基因型。若只使用單一或少數引子即無法判讀特定等位基因，必須整合所有反應結果一併判斷(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。 - 選項B
引子設計的核心在於必須高度特異地區分等位基因間微小的核苷酸差異，若一組引子能結合太多種等位基因，就失去辨別力，造成特異性與準確性下降(pmc.ncbi.nlm.nih.gov)。 - 選項C
PCR-SSP完全仰賴已
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