114年:(醫檢)檢驗(1)
若想利用轉錄介導的擴增法(transcription-mediated amplification, TMA)的技術執行病毒量檢測,下列敘述何者最正確?
A擴增的產物為DNA
B檢測過程需要利用溫度的改變來擴增核酸
C檢測時需要使用RNase H
D只能偵測RNA病毒,不能偵測DNA病毒
詳細解析
本題觀念:
本題聚焦在轉錄介導的擴增法(transcription-mediated amplification, TMA),一種等溫、在單一反應管內進行的核酸擴增技術,主要用於快速、敏感地檢測病毒載量。TMA結合了reverse transcriptase(RT)與T7 RNA polymerase兩種酵素,並透過RNase H活性切除RNA–DNA雜交區的RNA絲,使擴增循環得以持續。
選項分析
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選項A「擴增的產物為DNA」
TMA的終端產物為RNA amplicon,而非DNA。RT先合成cDNA,再由T7 RNA polymerase轉錄出大量RNA。RNA產物更不易汙染實驗室環境,也便於即時偵測 (en.wikipedia.org)。 -
選項B「檢測過程需要利用溫度的改變來擴增核酸」
TMA屬於等溫擴增技術,通常在40–55°C間恆溫進行,無需熱循環器或溫度變化 ([neb.com](https://www.neb.com/en-us/applications/dna-amplification-pcr-and-qpcr/isothermal-amplifi
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