114年:(醫檢)生化(1)
胺基酸進行薄層層析後,以下列何試劑染色最佳?
Apicrate
Bphosphotungstate
Cninhydrin
Dbiuret
詳細解析
本題觀念:
薄層層析(TLC)分離胺基酸後,這些分子本身無法用可見光直接顯色,需噴灑或浸入顯色試劑,使游離α-amino基或肽鍵轉化成有色產物。ninhydrin(2,2-dihydroxyindane-1,3-dione)可與胺基酸自由α-amino基反應,經加熱後生成紫色Ruhemann’s purple,靈敏度可達μg至ng級,為TLC胺基酸顯色最廣泛使用的試劑(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。
選項分析
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選項A picrate
Picric acid(2,4,6-trinitrophenol)主要與強鹼性有機化合物形成鹽類,或用於測定如alkaloids,對游離胺基酸無專一性,也無法與α-amino基形成有色複合物,因此不適合作為TLC胺基酸顯色試劑。 -
選項B phosphotungstate
Phosphotungstic acid常見於染色電子顯影或特定多醣負染,但與胺基酸不產生可辨識之特異顏色反應,亦非檢測胺基酸的標準方法。 -
選項C ninhydrin
Ninhydrin能與游離α-amino基反應,生成深紫色(Ruhemann’s purple)
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