114年:(醫檢)免疫病毒(1)
有關即時聚合酶鏈鎖反應（real-time PCR）的敘述，下列何者最適當？
ASYBR green系統原理是利用引子對（primer sets）結合病毒自身的單股與雙股基因
B當Tm值越高代表病毒濃度越低
CPCR跑35 cycles時產物放大2×35倍
DTaqMan系統中的DNA polymerase具有exonuclease活性
詳細解析
本題觀念：
針對 real-time PCR（qPCR）之定量原理與常見檢測化學方法，涵蓋非專一性染料（SYBR Green）與專一性探針（TaqMan）系統的作用機制，PCR 指數倍增法則，及關鍵量測參數 Ct（threshold cycle）與 Tm（melting temperature）的意義。
選項分析
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選項A
SYBR Green 系統並非利用引子結合病毒單股或雙股基因，而是以染料非專一性 intercalator 結合所有雙股 DNA，並在結合時產生螢光訊號，無需探針；引子（primers）僅負責擴增，並不直接參與螢光產生 (commerce.thermofisher.com)。
⇒ 誤 -
選項B
Tm（熔解溫度）反映的是特定 amplicon 或探針-序列雜交的熱穩定性，與樣品中病毒的初始濃度無關。研究顯示在 SYBR Green melting curve 分析中，T_m 與病毒量並無顯著相關性 ([pu
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