114年:(醫檢)免疫病毒(1)
有關數位聚合酶鏈反應（digital PCR）的核酸定量，下列何者正確？
A比較標準曲線以定量病毒核酸
B比較電泳上DNA片段強度以定量病毒核酸
C根據卜瓦松分布（Poisson distributions）以定量病毒核酸
D通常定量病毒的準確度低於即時聚合酶鏈反應（real-time PCR）
詳細解析
本題觀念：
本題聚焦 digital PCR（dPCR）的核酸絕對定量原理。dPCR 將樣本稀釋至微量反應分割（partition）中，透過擴增反應後判讀每個分割的正/負訊號，並利用 Poisson 分佈公式換算出原始樣本中目標核酸的絕對拷貝數量。
選項分析
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選項A「比較標準曲線以定量病毒核酸」
dPCR 不需依賴標準曲線，相較之下是 real-time PCR（qPCR）的相對定量方法才需建立標準曲線。dPCR 直接計算陽性分割比例並套用統計模型得到絕對拷貝數，不涉及標準曲線校正 (creative-biolabs.com)。 -
選項B「比較電泳上 DNA 片段強度以定量病毒核酸」
電泳強度屬於定性或半定量技術，靈敏度與準確度遠不及 PCR 類技術，與 dPCR 的微量分割與統計換算無關，故不正確。 -
選項C「根據卜瓦松分布（Poisson distributions）以定量病毒核酸」
正確。dPCR 依據各分割陽性（含至少一個分子）與陰性分割的比例，套用 Poisson 分佈公式 λ = −ln(1−p)，直接換算每單位體積的目標核酸平均
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