關於核酸的敘述，下列何者最不適當？

本題觀念：

本題聚焦於核酸（nucleic acid）在分子生物學實驗中之萃取（extraction）、儲存（storage）及定量（quantification）技術。涵蓋細胞裂解方法（如 alkaline lysis）、同時或單獨萃取 DNA/RNA 的策略、RNA 穩定性與儲存條件，以及利用光譜法（UV spectrophotometry）於 260 nm 測量核酸濃度的原理。

選項分析

• 選項A
  「可以用鹼性溶解法（alkaline lysis methods）處理 Gram-negative bacteria 來將核酸釋出」
  Alkaline lysis 最常用於細菌質體 DNA 的萃取，亦可釋放染色體 DNA；針對 Gram-negative bacteria，濃度約 0.03 M NaOH 即可有效使細胞壁與膜結構鬆散，釋放核酸，接續以 SDS 和 potassium acetate 中和、沉澱即獲得純化 DNA (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。此法快速、可靠，適用於多種 Gram-negative 菌株。

• 選項B
  「從檢體中執行核酸萃取，只能萃取出 DNA 或是 RNA 的其中一種」
  市售多種 total nucleic acid kit（如 Genes2Me OneXtract、Qiagen AllPrep DNA/RNA Kits）可同時萃取並純化 DNA 與 RNA，或 sequentially 提取同檢體內之 DNA 與 RNA；不僅限於單一核酸 (genes2me.com)。此選項斷言「只能擇一」，與事實不符。

• 選項C
  「萃取出的 RNA 較不穩定，最好是保存在 -70℃，並儘快執行後續分析」
  RNA 分子易受 RNase 降解，長期儲存建議 −80℃ 以下；多數文獻推薦在 −80℃ 或液氮條件下保存，並避免反覆凍融，以維持完整性 (mdpi.com)。實驗室常使用 −70℃ 深低溫箱，也可接受。

• 選項D
  「可以使用紫外分光光度計，測定 260 nm 吸光度並換算為核酸量」
  UV spectrophotometry 在 260 nm 處量測吸光度，依 Beer-Lambert 法則計算核酸濃度為業界標準；DNA 1 OD 對應約 50 μg/mL，RNA 約 40 μg/mL，並可同時計算 A260/A280 評估純度 (mt.com)。

答案解析

選項B 斷言「只能萃取出 DNA 或 RNA 其一」，違反同時或 sequential extraction 的技術實際應用。現有多款 commercial kits（如 Qiagen AllPrep DNA/RNA Kit）提供同檢體中 DNA 及 RNA 共同萃取或先後分次萃取，並無「只能擇一」之限制。故本題最不適當選項為 B。

核心知識點

• Cell lysis 方法：
  • Alkaline lysis（NaOH + SDS）—適用 Gram-negative，分離 plasmid vs chromosomal DNA
  • Detergent/lysozyme、mechanical（sonication、bead-beating）—針對 Gram-positive
• Nucleic acid extraction strategies：
  • Silica column、magnetic beads、phenol-chloroform、有 commercial kits 可 simultaneous extraction（DNA/RNA）
• RNA 穩定性與儲存：
  • 易被 RNase 分解，低溫（−80℃/−70℃）長期保存，避免反覆凍融
• UV spectrophotometry 定量：
  • 測量 A260，依 Beer-Lambert 法則計算濃度（DNA 50 μg/mL, RNA 40 μg/mL per OD unit），A260/A280 評估純度

臨床重要性

正確萃取並保存核酸為後續分子檢驗（如 PCR、NGS、基因表現分析）的基礎。掌握多樣化萃取方法、保證 RNA 穩定性與準確定量技巧，能提高診斷準確度與實驗重現性。