114年:(醫檢)檢驗(2)

下列那個限制酶的切割作用會受 CpG甲基化的影響?

AMspI
BHpaII
CKpnI
DNdeI

詳細解析

本題觀念:

限制酶的切割活性可能會因為其辨識序列上的 cytosine 是否被 5-甲基化 (5mC) 而改變。透過比較同一辨識序列的同識酶 (isoschizomers),可用於判定該位點的甲基化狀態。

選項分析

  • 選項A MspI
    MspI 與 HpaII 均識別序列 CCGG,但 MspI 對內層 CpG 的甲基化不敏感,仍能切割;只有當外層 cytosine (第一個 C) 甲基化時,MspI 切割才會被部分抑制。故 MspI 切割不會受內層 CpG 5mC 影響 (neb.com)

  • 選項B HpaII
    HpaII 亦識別 CCGG,但若內層 cytosine(CpG 中的 C)被甲基化,HpaII 的活性就會被完全抑制,無法切割。對內層 CpG 甲基化

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