114年:(醫檢)檢驗(2)

下列何種等位基因特異性檢驗方法,需要在基因放大且經限制酶切割後,再進行膠體電泳分析?

Aamplification refractory mutation system (ARMS)
Bmutagenically separated PCR (MS-PCR)
Cchemical cleavage of mismatch duplexes (CCM)
Damplified created restriction sites (ACRS)

詳細解析

本題觀念:

本題在考察各種等位基因特異性檢測(allele-specific detection)方法的原理差異,尤其聚焦於哪些技術步驟包含了基因擴增(PCR)、限制酶切割(restriction enzyme digestion)以及膠體電泳分析(gel electrophoresis)。

選項分析

  • 選項A:amplification refractory mutation system(ARMS)
    ARMS-PCR 亦稱 allele-specific PCR,透過在引子3′端設計與野生型或突變型專一結合的末端鹼基,使只有完全配對的引子能進行擴增;診斷步驟與擴增步驟合併,無需後續限制酶切割。擴增後直接進行膠電泳即可判讀特異性產物 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。因此不符合需「酶切後再膠電泳」的描述。

  • 選項B:mutagenically separated PCR(MS-PCR)
    MS-PCR 為一管多重檢測,採用一組不同長度的等位基因專一引子,同時擴增野生型與突變型片段;僅憑 PCR 產物長度差異進行電泳分辨,無需酶切 ([pubmed.ncbi.nlm.nih.gov](https://p

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