114年:(醫檢)檢驗(2)

原位螢光雜交法( FISH)是利用螢光探針偵測細胞內特定之 DNA序列,下列敘述何者最不適當?

A進行interphase FISH 時,所使用的 probe長度建議為 60~200 kb
B使用全染色體探針時,建議進行 interphase FISH
C偵測translocation 時,可設計兩條 probes進行檢測
D進行metaphase FISH 時,需加入 colcemides ,使細胞停在 metaphase

詳細解析

本題觀念:

本題探討 FISH(Fluorescence In Situ Hybridization)技術中 interphase 與 metaphase 的使用差異,包含探針大小、探針種類(locus‐specific probe、whole chromosome paint probe)及細胞週期處理方式(colcemid arrest)等技術要點。

選項分析

  • 選項A
    「進行 interphase FISH 時,所使用的 probe 長度建議為 60~200 kb」
    interphase FISH 為了在非分裂期細胞核中得到足夠的螢光訊號,locus‐specific probes(LSI probes)通常需至少 20 kb,且大多介於 100~300 kb 之間,最常見約 100~200 kb 範圍內。60~200 kb 屬於可接受範圍,符合臨床常用 interphase FISH 探針長度建議(basicmedicalkey.com)。

  • 選項B
    「使用全染色體探針時,建議進行 interphase FISH」
    Whole chromosome paint (WCP) 探針涵蓋整個染

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