利用標的擴增（ amplification ）技術進行病毒分子檢測時，下列何組病毒與偵測標的基因的配對最適當？

本題觀念：

本題聚焦於分子檢測中，利用標的基因（target gene）擴增（PCR/RT-PCR）做病毒診斷時，應選擇高度保守且代表性強的基因區段，以兼顧檢測的敏感度與廣泛性。

選項分析

• 選項A HCV：nucleoprotein gene
  HCV屬於Flavivirus科，人類C型肝炎病毒基因組長約9.6 kb，包含5′UTR、單一長開放閱讀框（ORF）及3′UTR，結構蛋白為Core（C）、E1、E2、p7，非結構蛋白為NS2～NS5B，並無標稱「nucleoprotein gene」。臨床RT-PCR常以5′UTR（高度保守）或NS5B區段為檢測標的，而非 nucleoprotein(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。

• 選項B influenza virus：conserved matrix gene
  Influenza A病毒基因組分為8段，Matrix (M) segment高度保守，廣泛應用於通用型RT-PCR篩檢以偵測所有亞型；多數FDA/CDC核准方法即以M基因為主標的，用於快速、敏感的全株偵測(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。

• 選項C SARS-CoV-2：DNA polymerase gene
  SARS-CoV-2為單股正義RNA病毒，無DNA聚合酶基因（DNA polymerase）。常見PCR標的為N基因（nucleocapsid）、E基因（envelope）或RdRp（RNA-dependent RNA polymerase，位於ORF1ab），並非DNA polymerase(wwwnc.cdc.gov)。

• 選項D BK virus（polyomavirus）：fusion gene
  BK virus屬小DNA病毒（Polyomavirus），基因組無膜融合蛋白（fusion protein），fusion gene見於Paramyxoviridae等包膜病毒。Polyomavirus檢測常以VP1/VP2（構造蛋白基因）或large T antigen區段為標的(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。

答案解析

Influenza A通用偵測需涵蓋所有亞型，M基因序列在不同亞型間保存度最高，適合做PCR引子設計；本題其他選項所列標的基因均與該病毒基因組結構或檢測慣例不符，只有選項B最妥當。

核心知識點

• 病毒基因組結構與常用分子檢測標的
  • HCV：5′UTR、NS5B區段（非nucleoprotein）
  • Influenza A：conserved M gene
  • SARS-CoV-2：N、E或RdRp區段（非DNA polymerase）
  • Polyomavirus：VP1/VP2或large T antigen（無fusion gene）

• 分子檢測設計要點
  • 標的基因需高度保守，避免偵測不到新變種
  • 盡量選擇全病毒亞型通用區段以提高廣泛性
  • 留意病毒是否具有該基因或蛋白才能作為標的

臨床重要性

適當的標的基因選擇可確保分子診斷的敏感度與廣泛性，降低偽陰性風險，對於公共衛生監測及臨床診斷極為關鍵。