D-zone test 是用來檢測 A群鏈球菌具有何種抗生素的誘導型抗藥機制？

本題觀念：

本題聚焦於MLS_B（macrolide-lincosamide-streptogramin B）耐藥表型中「誘導型clindamycin耐藥」的偵測機制。D-zone test（disk approximation test）透過 erythromycin（ERY）誘導 erm 基因表現，進而在 clindamycin（CL）抑菌圈邊緣產生 D 形扁平，判讀菌株是否具備 inducible clindamycin resistance (onlinelibrary.wiley.com)

選項分析

• 選項A clindamycin
  D-zone test 專門用來檢測在 ERY 存在下，菌株是否因 erm 基因誘導而對 CL 產生耐藥。若 ERY 耐藥、CL 初步敏感，且兩碟鄰近放置後 CL 抑菌圈呈 D 形，證實 inducible CL 耐藥，須報告為 CL 耐藥 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)

• 選項B daptomycin
  Daptomycin 的抗菌機制為膜去極化，與 MLS_B 耐藥基因無關，且不需透過 D-zone test 偵測。

• 選項C oxacillin
  Oxacillin 耐藥（例如 MRSA）主要源自 mecA 編碼的 PBP2a，與 erm-mediated 耐藥無關，不以 D-zone test 偵測。

• 選項D tetracycline
  Tetracycline 耐藥通常由 tet 基因介導的外排泵或 ribosome protection，非 macrolide-lincosamide-streptogramin B 交叉耐藥，不用 D-zone test。

答案解析

D-zone test（disk approximation）為 CLSI 推薦的標準方法，用於在 Mueller-Hinton 5% 羊血瓊脂上，以 15–26 mm（edge-to-edge）距離佈置 ERY（15 μg）與 CL（2 μg）紙片培養 20–24 小時。當菌株攜帶 ermA/ermB/ermTR 基因且初步顯示 ERY 耐藥、CL 敏感，ERY 可誘導 rRNA 甲基化酶表現，使 CL 無法結合 23S rRNA，近 ERY 端的 CL 抑菌圈被「抹平」成 D 形，判讀為誘導型耐藥（MLSB_i），臨床上應報告為 CL 耐藥，以避免治療失敗 (onlinelibrary.wiley.com)

核心知識點

• MLS_B 耐藥：由 erm 基因（ermA、ermB、ermTR）編碼 rRNA 甲基化酶，介導 macrolide-lincosamide-streptogramin B 交叉耐藥
• 耐藥表型差異
  • MLSB_c（constitutive）：常規敏感度試驗即可檢出 CL 耐藥
  • MLSB_i（inducible）：須 D-zone test 或相應微量稀釋誘導測試
• D-zone test 原理與操作：
  1. 培養基：Mueller-Hinton agar + 5% sheep blood
  2. 紙片距離：15–26 mm edge-to-edge
  3. 紙片劑量：ERY 15 μg、CL 2 μg
  4. 孵育：20–24 小時，35°C，5% CO₂（或環境空氣）
  5. 判讀：CL 抑菌圈近 ERY 處扁平呈 D 形即陽性
• 臨床意義：未偵測 MLSB_i 耐藥可能導致 CL 治療失敗，特別在 GAS、Staphylococcus aureus、其他 beta-hemolytic Streptococci 感染時需留意

臨床重要性

透過 D-zone test 排除誘導型 clindamycin 耐藥，可指導臨床正確選用 CL 或其他抗生素，避免治療失敗與抗藥性擴散。