依據CLSI規範，何種細菌採用紙錠擴散法（ disk diffusion method ）進行藥敏試驗時，需提供 5～7％ CO2進行培養？

本題觀念：

本題探討依據CLSI M02/M100標準，不同細菌在紙錠擴散法（disk diffusion）抗菌藥物敏感性測試時的培養條件，特別是哪一類細菌需於5～7％ CO₂氣相中孵育，以滿足該細菌的生長需求並確保測試結果的準確性。

選項分析

• 選項A 大腸桿菌（Escherichia coli）
  大腸桿菌屬於非快idious（非需氧特殊營養）菌種，常用Mueller-Hinton agar培養，於35°C、常壓空氣中孵育16–18小時即可產生可測量的抑菌圈，無需額外CO₂補充。

• 選項B 綠膿桿菌（Pseudomonas aeruginosa）
  綠膿桿菌同屬非快idious革蘭陰性桿菌，亦在標準Mueller-Hinton agar、常壓空氣中孵育，不需CO₂；CLSI QC菌株ATCC 27853即於 ambient air條件下做disk diffusion quality control。

• 選項C 金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）
  S. aureus屬非快idious革蘭陽性球菌，disk diffusion測試同樣使用Mueller-Hinton agar、ambient air孵育，不需CO₂環境。

• 選項D 流行性感冒嗜血桿菌（Haemophilus influenzae）
  H. influenzae屬於需營養型或半挑剔性（fastidious）菌種，CLSI規範指出disk diffusion測試需使用含Supplemented Mueller-Hinton agar（HTM）或chocolate agar為基質，並於35 °C、5％ CO₂氣相中孵育16–18小時，才能保證其生長良好並得出正確的抑菌圈直徑 (passeidireto.com)。

答案解析

只有流行性感冒嗜血桿菌（Haemophilus influenzae）這類半挑剔性菌株需要額外CO₂以滿足其生長需求，其它選項皆可在常壓空氣（ambient air）中於標準Mueller-Hinton agar上完成disk diffusion測試。依據CLSI M100 Table 2E所示，H. influenzae disk diffusion必須在5% CO₂氣相中孵育，以確保培養基pH和O₂/CO₂平衡適合其成長並產生可測量的抑菌圈直徑 (passeidireto.com)。

核心知識點

• 抗菌藥敏實驗方法：disk diffusion（Kirby–Bauer）
• 常用培養基：Mueller-Hinton agar vs. Supplemented Mueller-Hinton agar (HTM) 或 Chocolate agar
• 孵育條件：
  • 普通菌株（E. coli、P. aeruginosa、S. aureus）：35 °C、ambient air、16–18 h
  • 半挑剔性菌（H. influenzae、Neisseria spp., S. pneumoniae）：35 °C、5–7% CO₂、16–18 h
• 快idious organism生長需求：CO₂增補、血營養成分
• CLSI文件：M02 (disk diffusion methods)、M100 (breakpoints & QC)

臨床重要性

標準化的抗菌敏感性測試有助於正確判讀抑菌圈大小，避免因培養條件不符而產生偽陰性或偽陽性結果，進而影響臨床用藥決策與治療成效。