目前系統性雙形性真菌主要是使用下列何種方法進行確定診斷？

本題觀念：

系統性雙形性真菌感染（如 Histoplasma capsulatum、Blastomyces dermatitidis、Coccidioides immitis/posadasii、Paracoccidioides brasiliensis 等）因其在環境與人體內呈現不同形態，加上臨床表現與細菌或其他病因肺炎相似，傳統診斷常仰賴培養與形態學檢查，但這些方法敏感度低且需耗時數週。近年分子生物學技術（PCR、DNA 探針）因檢測特異性高、可直接分型而逐漸成為確定診斷的主要工具。

選項分析

• 選項A 形態學檢查
  優點：培養後於顯微鏡下觀察孢子、酵母、分枝菌絲等典型形態，可直接證實真菌存在，屬「proven diagnosis」金標準之一。缺點：生長緩慢（Histoplasma、Coccidioides 等需培養 2–6 週），敏感度僅約 50%，且無法快速分子分型，難以即時指引臨床決策(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。

• 選項B 血清學檢查
  常用方法為 immunodiffusion (ID) 與 complement fixation (CF)。敏感度 28%–65%（ID）或 9%–57%（CF），特異度不一且易受之前感染或接種影響，無法提供即時、確定診斷，僅作輔助診斷用途(cdc.gov)。

• 選項C 抗原檢查
  尿液或血清抗原 EIA 具高敏感度（Histoplasma 尿抗原靈敏度可達約 90%；Blastomyces 尿抗原 76%–93%），但特異度因與 Histoplasma、Blastomyces 交叉反應而降低，仍屬輔助檢測，需結合其他方式確認診斷(cdc.gov)。

• 選項D DNA 檢查
  利用 PCR、DNA 探針等分子方法，可直接檢測真菌特異性基因片段，敏感度可達 67.6%–100%，特異性高，能同時分辨多種雙形性病原（例如 rep-PCR 法在相似度 ≥85% 時對 Coccidioides、Blastomyces、Histoplasma 鑑定正確率達 97.2%），且結果可於數小時至數天內取得，為目前各大醫學中心最常使用的確定診斷方法之一(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。

答案解析

系統性雙形性真菌感染的「確定診断（definitive diagnosis）」傳統雖以病理學或培養證實為金標準，但因染色形態學檢查與培養的時間成本高、敏感度有限，且份子分型與物種鑑定難及時滿足臨床需求。目前臨床上主要採用分子生物學方法（PCR、DNA 探針）直接檢測病原體 DNA，提供快速、高特異的診斷結果，並能明確分辨不同病原種類，故本題正解為選項 D DNA 檢查。

核心知識點

• 雙形性真菌生命週期：環境形態（mold, hyphae, conidia）與體內形態（yeast、spherule）之轉換機制
• 傳統診斷方法：
  1. 培養與顯微鏡形態學檢查（金標準﹐但耗時且敏感度低）
  2. 血清學抗體檢測（ID、CF；敏感度與特異度受限，需輔助判讀）
  3. 抗原檢測（尿液/血清 EIA；靈敏度高但易交叉反應）
• 分子診斷技術：PCR、DNA 探針、real-time PCR、digital PCR；對多種雙形性病原具高靈敏、高特異，能於臨床數小時至數天內提供確定診斷
• 代表疾病：Histoplasmosis、Blastomycosis、Coccidioidomycosis、Paracoccidioidomycosis、Sporotrichosis

臨床重要性

快速且精確的分子診斷可縮短診斷時間、避免不必要的抗菌治療延誤，並即時指引抗真菌藥物的選擇和治療時機，提升重症與免疫抑制患者的預後。