113年:(醫檢)檢驗(2)
有關化學切割錯誤的鹼基（chemical cleavage of mismatch duplexes, CCM）檢驗方法，下列敘述何者最不適當？
A可以有效偵測點突變（point mutation）
B由切割產生的片段大小可定位出突變點的位置
C利用一對具有螢光標示的引子（primers）進行PCR，將變異的與野生型的DNA片段放大
D可以使用非變性瓊脂凝膠電泳（non-denaturing agarose gel electrophoresis）分析
詳細解析
本題觀念：
化學切割錯誤的鹼基（chemical cleavage of mismatch duplexes, CCM）是一種利用化學試劑選擇性修飾異源雙股DNA中錯配（mismatch）的核苷，再以piperidine切割骨架，最後對切割片段進行電泳定量與比對，以偵測並定位點突變、插入或缺失的分子生物學技術。
選項分析
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選項A
CCM可偵測點突變，因為異型雙股（heteroduplex）中一個鹼基錯配會被hydroxylamine（修飾C）或potassium permanganate（修飾T）特異性標記，再進行piperidine切割，產生可由電泳檢出的片段，對點突變具有高敏感度。實驗證實CCM對點突變有良好檢出率（Sensitivity）及特異性（Specificity）(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。 -
選項B
CCM依據錯配發生位置不同，切割產生的斷裂片段大小也不同，並在電泳膠上呈現特定帶型，可由片段長度推算錯配所在的位置，故可定位突變位點。相關protocol明確指出「Fragments are sized on sequencing gels … to indi
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