有關革蘭氏染色試劑與使用順序下列何者正確？①3％ HCl　②95％ ethyl alcohol　③iodine　④safranin O　⑤Tergitol　⑥10％ KOH　⑦crystal violet　⑧methylene blue

本題觀念：

Gram 染色（Gram staining）是微生物學最基本的分色技術，透過四步驟（primary stain、mordant、decolorizer、counterstain）區分細菌為 Gram-positive（紫色）或 Gram-negative（紅/粉色）。第一步用 Crystal violet 染色所有細胞；第二步加入 Iodine 固定染料；第三步以 95% ethanol 為去色劑，只去除 Gram-negative 的 Crystal violet；第四步以 Safranin O 作反染，使去色的 Gram-negative 著粉紅色 (laboratoryinsider.com)。

選項分析

• 選項 A (③⑧①④: iodine → methylene blue → 3% HCl → safranin O)
  1. 第二劑不該是 methylene blue，Gram 染色不使用此染料 ([biohackacademy.github.io](https://biohackacademy.github.io/bha2/class/4/gram-staining/?

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