113年:(醫檢)生化(2)
若要分離 Pro-Ser-Val-Ala-Ile 與 Asn-Ala-Thr-Ser-Pro 兩條胜肽(peptide),使用下列那種方法最為合適?
Asize-exclusion chromatography
Bion-exchange chromatography
CAffinity chromatography
Dreversed-phase liquid chromatography
詳細解析
本題觀念
肽段分離技術依賴分子特性差異,包含分子量(size-exclusion)、電荷(ion-exchange)、特異性配體(affinity)與疏水性(reversed-phase)。本題兩條肽均為五胺基酸,分子量相近、無帶電側鍊,惟疏水性差異明顯,故以 reversed-phase liquid chromatography (RPC) 最適合。
選項分析
-
選項A size-exclusion chromatography
原理是透過凝膠截留(gel filtration)依分子大小分離。兩條肽均為五個胺基酸,分子量相近(約500–600 Da),在截留孔徑相同的凝膠中保留體積相同,無法分離 (en.wikipedia.org)。 -
選項B ion-exchange chromatography
依分子淨電荷與離子交換樹脂相互作用。兩肽序列不含酸(Glu, Asp)或鹼(Lys, Arg, His)側鍊,僅有末端NH₃⁺與COO⁻,在中性 pH 下淨電荷皆接近零,樹脂鍵結差異極小,難以分離 ([en.wikipedia.org](https://en.
...(解析預覽)...