113年:(醫檢)生化(2)
甲和乙兩種蛋白質分子量均為50 kDa,而甲的 pI=6,乙的 pI=8,則在 pH 8 的緩衝液下電泳,理論上移動方向為何?
A甲往正極
B乙往負極
C甲乙均往正極
D甲乙均往負極
詳細解析
本題觀念:
蛋白質 isoelectric point(pI)與環境 pH 的比較,決定蛋白質的淨電荷與在電場中之遷移方向。若 pH>pI,蛋白質帶負電,向正極(anode)移動;若 pH<pI,帶正電,向負極(cathode)移動;若 pH=pI,電中性,不遷移。
選項分析
- 選項A 甲往正極
甲的 pI=6,緩衝液 pH=8 >6,因此帶負電,朝正極移動;乙的 pI=8,pH=8=pI,帶淨電荷為零,不遷移。符合題意。 - 選項B 乙往負極
若 pH<pI,蛋白質帶正電才會朝負極移動;此處 pH=8 與乙的 pI 相同,乙為電中性,不會朝負極移動。錯誤。 - 選項C 甲乙均往正極
乙在 pH=8 時為電中性,不會往正極移動。錯誤。 - 選項D 甲乙均往負極
甲在 pH=8 時帶負電,應往正極;乙不遷移。此選項完全不符。錯誤。
答案解析
蛋白質在 native-PAGE 中的遷移方向取決於蛋白質在當前緩衝液 pH 下的淨電荷。pH>pI 時蛋白質帶負電,向正極移動;pH=pI 時電中性,不移動。故 甲(pI=6)於 pH8 帶負電,朝正極移動;乙(pI=8)於 pH8 電中性,不移動。正確答案為選項 A ([britannica.com](https://www.britannica
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