113年:(醫檢)生化(2)

利用aspartate aminotransferase(AST)與malate dehydrogenase(MD)的酵素活性進行aminotransferase與dehydrogenase反應來檢測AST,如下圖,反應最後是利用340 nm波長光測量那一個物質的吸光值變化? 圖片描述

ANAD+
BNADH
CL-malate
DL-glutamate

詳細解析

本題觀念

利用 AST(Aspartate Aminotransferase)與 MD(Malate Dehydrogenase)串聯催化反應,以 NADH 在 340 nm 的吸光度變化,間接量測 AST 活性。

影像分析

圖中分兩段:

  1. AST 催化:L-Aspartate + 2-Oxoglutarate → Oxaloacetate + L-Glutamate
  2. MD 催化:Oxaloacetate + NADH + H+ → L-Malate + NAD+
    箭頭顯示 oxaloacetate 生成後立即被 MD 還原,而此步驟將 NADH 氧化為 NAD+。340 nm 的紫外光正是 NADH 的吸收峰所在,NAD+ 則無此特徵吸收。

選項分析

  • 選項A NAD+
    NAD+ 在 340 nm 幾乎不吸光,無法透過該波長監測,因此不具測定意義 (worthingtonweb.com)。

  • 選項B NADH
    NADH 在 340 nm 有明顯吸收峰。MD 催化時,NADH 被氧化為 NAD+,導致 A₃₄₀ 減少,其變化速率與 AST

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