113年:(醫檢)免疫病毒(2)
有關病毒分子檢驗所使用的探針(probe):TaqMan及molecular beacon之敘述,下列何者錯誤?
A兩者皆具有螢光報導分子(fluorescent reporter)及猝滅劑(quencher)
B後者形成髮夾型(hairpin)二次結構
C兩者在反應中之活性皆會被DNA聚合酶的內切酶(endonuclease)破壞
D兩者皆可用於定量病毒核酸
詳細解析
本題觀念:
本題聚焦於 real-time PCR 中兩種常見探針—TaqMan probe 及 molecular beacon probe—在結構、作用原理與定量應用上的差異。兩者均利用螢光與猝滅機制(FRET)來即時監測 PCR 產物,但分別藉由核酸酶切割或構象改變來產生螢光信號。
選項分析
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選項A
兩者皆具有螢光報導分子(fluorescent reporter)及猝滅劑(quencher)。
TaqMan probe 在 5′ 端標記 reporter,在 3′ 端標記 quencher;molecular beacon 同樣在兩端分別標示 reporter 與 quencher,只有在螢光與猝滅基團相鄰時才有效抑制螢光輸出 (commerce.thermofisher.com)。此選項為真。 -
選項B
後者形成髮夾型(hairpin)二次結構。
molecular beacon 探
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