113年:(醫檢)免疫病毒(2)

有關應用LAMP(loop-mediated isothermal amplification)技術於病毒快速診斷的敘述,下列何者最不適當?

A主要使用一種DNA polymerase進行反應
B只需要兩對具專一性的引子進行反應
C可用螢光方式進一步設計成可以定量的檢測方式Q-LAMP(Quantitative-LAMP)
D目前已有產品應用此技術於病毒檢測

詳細解析

本題觀念:

此題聚焦 LAMP(loop-mediated isothermal amplification)技術於病毒快速診斷時的特性,包括所需酶種、引子數目、定量能力以及商用化進程。

選項分析

  • 選項A 主要使用一種DNA polymerase進行反應
    LAMP 採用具有 strand-displacement 活性的 Bst DNA polymerase(或類似酶)在恆溫(約60–65°C)條件下放大目標,不需像 PCR 需多種酶或反覆熱循環。(neb.com)

  • 選項B 只需要兩對具專一性的引子進行反應
    標準 LAMP 至少使用 4 支引子(2 對:F3/B3 外引子及 FIP/BIP 內引子),可再加入 2 支環引子(LoopF/LoopB)共 6 支,以加速反應並增高特異性;實際識別區域達 6–8 段。僅有兩對引子描述過度簡化,漏掉環引子,反應效率與專一性不夠,故此選項錯誤。([applbiolchem.s

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