113年:(醫檢)檢驗(1)
由全轉錄體定序(whole transcriptome sequencing)產出用於敘述各個基因產物豐度的 fragments per kilobase of transcript per million mapped reads(FPKM)值,最不會受到下列那個因子的影響?
A定序基因產物的長度
B可正確比對至定序基因產物的讀長數(mapped reads)
C定序讀長
D定序深度(reading depth)
詳細解析
本題觀念:
本題核心在於理解 FPKM(Fragments Per Kilobase of transcript per Million mapped reads)這種 RNA-Seq 定量指標的計算方式與適用範圍。FPKM 同時考量了基因/轉錄本長度以及總 mapped reads(測序深度)的影響,以便在同一樣本或不同樣本之間比較各基因的相對表現量。
選項分析
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選項 A:定序基因產物的長度
FPKM 分母有一個 L(基因或轉錄本長度,以 kb 為單位),公式 FPKM = RM_g × 10^9 / (RM_t × L) 明確顯示長度會影響結果,長度越長、同樣讀數下 FPKM 越小。故此選項錯誤。 (docs.gdc.cancer.gov) -
選項 B:可正確比對至定序基因產物的讀長數(mapped reads)
FPKM 的分子 RM_g 即是該基因/轉錄本的 mapped reads 數量(或 fragment 數),mapping 數越多、同樣其他條件下 FPKM 越大。顯然受此因子影響,故此選項錯誤。 ([docs.gdc.cancer.gov](https://docs.gdc
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