113年:(醫檢)檢驗(1)

下列何種螢光物質最常應用於DNA晶片的偵測?

Afluorescein和rhodamine
BDAPI和propidium iodide
Cacridine orange和Texas Red
DCy3和Cy5

詳細解析

本題觀念:

DNA晶片(microarray)技術利用螢光標記寡核苷酸探針或互補DNA,於雜交後以螢光掃描器偵測螢光強弱變化,反映樣本中目標序列的相對豐度。選擇適當的螢光染料需考量其激發/發射波長、生物相容性、光穩定性及量子產率等。Cy3與Cy5為一對常用的雙色螢光標記,可同時比較兩組樣本,故最常應用於DNA晶片偵測。

選項分析

  • 選項A fluorescein和rhodamine
    fluorescein(如FAM)和rhodamine系列染料常用於qPCR探針或FISH,但在微陣列實驗中,這兩種染料的光穩定性及光譜重疊不如Cy系染料,且難以實現高靈敏度雙色比較,故不為主流選擇。

  • 選項B DAPI和propidium iodide
    DAPI與propidium iodide專門染核酸,用於細胞核螢光染色或流式細胞儀核酸定量,並非用於標記寡核苷酸探針進行晶片雜交檢測。

  • 選項C acridine orange和Texas Red
    acridine orange與Texas Red多用於細胞染色或組織切片螢光標記,並非主流用於DNA晶片探針標記,其光譜特性及化學活性亦不及Cy3/Cy5優異。

  • 選項D Cy3和Cy5
    Cy3 (excitation ~550 nm, emission ~570 nm

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