113年:(醫檢)檢驗(1)
關於 nucleic acid sequence-based amplification（NASBA）的敘述，下列何者最不適當？
A此技術已被廣泛應用於RNA病毒與細菌的偵測
B可以加入寡核苷酸探針的信號分子（molecular beacon），再藉由反應後所產生之螢光訊號的強度定量 RNA，此稱為 real-time NASBA
C若檢體中有少量雙股DNA存在，會有偽陽性的結果，所以反應時需要加入DNase去除DNA
Dreal-time NASBA的擴增與檢測反應，全在同一密閉管內進行，可以降低核酸污染發生的可能性
詳細解析
本題觀念：
本題聚焦 nucleic acid sequence-based amplification（NASBA）技術的原理與應用。NASBA 為一種等溫（約41℃）核酸擴增技術，以 RNA 為靶標，結合逆轉錄酶（AMV-RT）、RNase H、T7 RNA polymerase 及特異性引子，能在單一反應體系中完成 RNA 的擴增，並可藉由分子探針（molecular beacon）實現 real-time 定量。
選項分析
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選項A：「此技術已被廣泛應用於RNA病毒與細菌的偵測」
NASBA 最早即用於HIV-1、HBV等 RNA 病毒載量檢測，並能針對細菌中16S rRNA或tmRNA序列進行即時偵測。例如聚合 HIV-1 RNA 的靈敏度可達10分子，而檢測 Ralstonia solanacearum 取決於 16S rRNA 即可區分活菌與死菌，證實 NASBA 可用於細菌 RNA 偵測與活性評估 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。此敘述正確。 -
選項B：「可以加入寡核苷酸探針的信號分子（molecular beacon），再藉由反應後所產生之螢光訊號的強度定量 RNA，此稱為
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