113年:(醫檢)生化(1)
使用 urease 檢測尿素(urea)濃度,下列敘述何者錯誤?
Aurease 酵素的系統分類屬於水解酶類(hydrolases)
B可搭配 urease/glutamine synthetase/pyruvate oxidase,偵測H2O2變化
C可搭配離子選擇性電極,偵測銨離子生成速率
D可搭配 glutamate dehydrogenase,偵測 NADH 增加速率
詳細解析
本題觀念:
動力學酵素連鎖反應於尿素(urea)測定的原理。重點在於透過 urease 催化水解生成 NH₃,再搭配其他酵素路徑,將 NH₃ 轉化或產生活性可偵測產物(如 H₂O₂、NH₄⁺ 或 NAD(P)H 變化),以光學、電極或電化學方式量化尿素濃度。
選項分析
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選項A:urease 酵素系統分類屬於水解酶類(hydrolases)。
• 根據 IUBMB 與 KEGG 註記,urease 的 EC 編號為 3.5.1.5,系屬 hydrolases(作用於非胜肽鍵之碳氮鍵),子類為線性醯胺水解酶 (kegg.jp)。 -
選項B:可搭配 urease/glutamine synthetase/pyruvate oxidase,偵測 H₂O₂ 變化。
• 典型作法為:urease 將 urea 水解為 NH₃;glutamine synthetase(GS)利用 NH₃ 與 glutamate 及 ATP 產生 glutamine 與 ADP;再經由 pyruvate kinase 與 pyruvate oxidase 連續反應,生成 H₂O₂;最後以 peroxidase/染料比色測定 H₂O₂ 吸光度 ([p
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