下列何種方法較難區別 transferrin 及 carbohydrate-deficient transferrin 在體內濃度的差異？

本題觀念：

本題考轉鐵蛋白（transferrin）與缺醣轉鐵蛋白（carbohydrate-deficient transferrin, CDT）的分析化學原理，重點在理解各種分離技術的依據（分子量、電荷、醣鏈結構），從而判斷哪種方法最難區分兩者在體內濃度的差異。

選項分析

(A) 凝膠過濾層析（gel filtration） ← 正確答案：最難區別 凝膠過濾層析（gel filtration chromatography，又稱 size-exclusion chromatography, SEC）依分子量大小分離蛋白質。Transferrin 分子量約 79 kDa，CDT 是 transferrin 的去醣基化型態（缺少 1 或 2 條 N-聯醣鏈），缺少醣鏈後分子量差距僅約 2.5–5 kDa（每條醣鏈約 2.4 kDa），相對於 79 kDa 的整體分子量，差異極小（<6%），凝膠過濾層析無法有效解析如此微小的分子量差異，因此幾乎無法區別 transferrin 與 CDT。這也是為什麼凝膠過濾在 CDT 分析中僅被用作純化步驟，而非定量分析工具。

(B) 等電點電泳（isoelectric focusing, IEF） → 可以區別 等電點電泳（isoelectric focusing, IEF

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