112年:(醫檢)檢驗(1)

下列何者不需要運用探針雜交法來鑑定細菌的檢測?

A固相寡核苷酸晶片
B原位螢光雜交法
C液相晶片
D單股結構多型性分析法

詳細解析

本題觀念:

核心在於分辨以「核酸探針雜交」(probe hybridization)方式鑑定細菌的技術,與完全不須探針雜交、而是依靠單股 DNA 二級構象差異分辨的 SSCP 方法之間的差異。

選項分析

  • 選項A:固相寡核苷酸晶片
    微陣列(DNA microarray)技術將合成的寡核苷酸探針固相化於玻璃片表面,檢體中標記後的目標序列會與之互補雜交,再經螢光或化學方式檢測訊號。此即典型的探針–目標雜交方式。citeturn0search5

  • 選項B:原位螢光雜交法
    FISH 利用螢光標記的 DNA(或 PNA)探針,在保留細胞/組織結構的情況下直接與細胞內的 rRNA 等靶序列互補雜交,並以螢光顯微鏡觀察定位與鑑定細菌。明顯仰賴探針雜交。citeturn1search2

  • 選項C:液相晶片
    以 Luminex xMAP 等懸浮微球陣列為例,先將不同螢光條碼的微球偶聯各自寡核苷酸探針,與 PCR 放大的標記靶序列在液相中雜交,再以流式細胞儀檢測微球螢光;同樣屬於探針雜交技術。citeturn2search1

  • 選項D:單股結構多型性分析法
    SSCP 先以 conserved primer 放大目標 DNA,將產物變性成單股後,在非變性膠中依序列差異形成獨特二級構象,再透過電泳遷移率

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