下列何者不是 nested PCR 方法的優點？

本題觀念：

nested PCR是以兩組不同位置的引子（outer primers與inner primers）進行兩輪連續擴增，其設計初衷在於提升擴增的靈敏度與特異性，常用於低拷貝數或背景複雜的臨床樣本檢測。

選項分析

• 選項A 敏感性（sensitivity）高
  nested PCR透過第一輪放大後，再以第二組內部引子進行放大，整體循環數提高，可檢出極低量的目標DNA，靈敏度顯著增強 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)

• 選項B 特異性（specificity）高
  第二輪的內部引子必須結合於第一輪的正確產物序列，若第一輪產物為非特異性序列，第二輪無法有效放大，大幅降低非特異性產物產生 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)

• 選項C PCR反應模板（template）所需量較低
  因為nested PCR能在極低拷貝數下仍產生明顯條帶，對於臨床樣本中低豐度目標的檢出極具優勢，所需初始模板量相對減少 ([pubmed.ncbi.nlm.nih.gov](h

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