112年:(醫檢)檢驗(2)
下列何種藥品可以將胞嘧啶( cytosine )間接轉變成尿嘧啶( uracil ),以分析 CpG 位點的甲基化狀態?
A重亞硫酸鈉
B重亞硝酸鈉
C重亞碳酸鈉
D重亞磺酸鈉
詳細解析
本題觀念:
本題聚焦在「核酸甲基化分析」的經典方法──硫酸氫鹽(bisulfite)處理法。此法利用化學試劑選擇性地將未甲基化的胞嘧啶(cytosine, C)脫胺(deamination)轉變為尿嘧啶(uracil, U),而5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine, 5mC)則不受影響。後續以PCR及定序比較原始基因組序列,可於單核苷酸解析度下判別CpG位點的甲基化狀態。
選項分析
-
選項A 重亞硫酸鈉(sodium bisulfite, NaHSO₃)
誘導胞嘧啶經「脫氫硫化—脫胺—脫硫」三步驟反應,將C轉為U,5mC則不反應;為DNA甲基化分析的黃金標準試劑 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。 -
選項B 重亞硝酸鈉(sodium nitrite, NaNO₂)
主要用於亞硝化反應,可使胺基被亞硝基化並誘發脫胺,但並非專一於單股DNA上胞嘧啶的脫胺,且在甲基化分析上無此應用,故不正確。 -
選項C 重碳酸鈉(sodium bicarbonate, NaHCO₃)
弱鹼性緩衝劑,無脫胺或硫化能力,無法將胞嘧啶轉變成尿嘧啶。 -
選項D 重亞磺酸鈉(so
...(解析預覽)...