112年:(醫檢)檢驗(2)
關於分子檢驗的血液檢體採集,下列敘述何者最不適當?
A抗凝劑 heparin會抑制 PCR 反應
B血色素會抑制 PCR 反應
C當檢測標的物為 DNA ,檢體放置在 2 ~ 8oC時,建議在 1個月內進行核酸萃取
D當檢測標的物為 RNA ,檢體放置在 2 ~ 8oC時,建議在 4小時內進行核酸萃取
詳細解析
本題觀念:
本題聚焦在分子檢驗(PCR/RT-PCR)血液檢體的前處理與保存條件,主要考察抗凝劑及血液成分對PCR抑制效果,以及DNA與RNA檢體在2–8°C下的穩定性與保存期限。
選項分析
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選項A 抗凝劑 heparin會抑制 PCR 反應
文獻指出 heparin 與 PCR 反應中所需之 DNA polymerase 或其他酵素有干擾作用,使擴增失敗或抑制反應,故臨床實務中避免使用 heparin 管採血,改用 EDTA 作為分子檢驗的首選抗凝劑。 (depts.washington.edu) -
選項B 血色素會抑制 PCR 反應
紅血球中的血紅素(heme)為已知 PCR 抑制劑,特別在血液樣本反覆凍融時釋出的大量 heme,會直接抑制聚合酶活性,降低擴增效率。若冷凍樣本中未去除紅血球,更易造成抑制。 (pmc.ncbi.nlm.nih.gov) -
選項C 當檢測標的物為 DNA,檢體放置在 2~8°C時,建議在 1個月內進行
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