112年:(醫檢)檢驗(2)
醫學檢驗室選擇使用高通量基因定序進行細菌分型鑑定時,下列敘述何者最正確?
A短片段基因定序產生的通量大於長片段基因定序,因此細菌分型只能使用短片段定序法
B細菌基因序列具有高 GC 比的特性,因此不建議使用高通量基因定序進行細菌分型
C短片段基因定序可以完成 100% 的細菌全基因組序列組裝( assembly )
D單分子即時定序法( single molecule real-time sequencing )不受細菌基因組中的高 GC 比區域的影響
詳細解析
本題觀念:
細菌分型鑑定時,實驗室常用高通量基因定序(High-Throughput Sequencing, HTS)技術,需考量定序平台的讀長(read length)、通量(throughput)、GC 含量偏好(GC-bias)及組裝(assembly)能力等特性。
選項分析
- 選項A
「短片段基因定序產生的通量大於長片段基因定序,因此細菌分型只能使用短片段定序法」
• 短片段(short-read)平台(如 Illumina)確實具有更高通量,可產生上百萬至上千萬條短序列讀段;長片段(long-read)平台(如 PacBio SMRT、Oxford Nanopore)每次產出讀段數量較少,通量較低 (aatbio.com)。
• 但細菌全基因組分型不僅仰賴通量,還須解決重複序列與結構變異的辨識,長片段序列在基因組組裝與複雜結構變異偵測方面更具優勢,因此不會「只能使用短片段定序」;此選
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