112年:(醫檢)微生(2)
有關脈衝式電泳分析( pulsed-field gel electrophoresis )的敘述,下列何者錯誤?
A一般被視為細菌分型的標準方法
B需溶解細菌使其染色體 DNA 裸露
C需複製細菌的染色體 DNA
D需使用限制酶( restriction endonucleases )切斷細菌的染色體 DNA
詳細解析
本題觀念:
本題聚焦於分子分型技術中,脈衝式凝膠電泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)的基本原理與應用場景。PFGE利用交替方向的電場來分離高分子量的DNA片段,在流行病學監測、菌株定型及感染源追蹤中常被視為「金標準」方法。
選項分析
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選項A
PFGE被廣泛應用於細菌分型研究,尤其在食源性病原體及臨床常見細菌(如Staphylococcus aureus、Listeria monocytogenes)的流行病學調查中,因其高分辨率與可比對性,被公認為細菌分型的標準方法或「gold standard」技術之一。 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov) -
選項B
為了獲得完整的染色體DNA片段,需要先將活菌細胞固定於琼脂糖微膠球(agarose plug)中,接著利用裂解緩衝(lytic buffer)或酶(如lysostaphin、proteinase K)原位裂解細胞壁,釋放未受剪切的整染色體DNA,之後才能進行限制酶消化與電泳分離。因此,「需溶解細菌使其染色體DNA裸露」的敘述正確。 ([pubmed.ncbi.nlm.nih.gov
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