112年:(醫檢)生化(1)
使用 biuret method 定量蛋白質時,下列敘述何者正確?
A通常利用酸性環境進行此反應
B試劑中含 biuret 可促進呈色
C反應後產生黃色複合物可供偵測
D試劑中含 Cu2+ 可與胜肽鍵作用
詳細解析
本題觀念:
Biuret法藉由Cu²⁺在強鹼環境中與蛋白質肽鍵配位,生成紫色配合物,其吸光度與肽鍵數量成正比,用於蛋白質定量。
選項分析
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選項A 通常利用酸性環境進行此反應
Biuret反應需在鹼性介質(NaOH或KOH)中進行,以去質子化肽鍵並促使Cu²⁺配位,並非酸性環境(vedantu.com)。 -
選項B 試劑中含 biuret 可促進呈色
雖名為“Biuret reagent”,實際組成為CuSO₄、強鹼及穩定劑(sodium potassium tartrate),並不含biuret分子;試劑名稱源自與biuret分子相似的肽鍵反應,並非添加biuret本身(chemeurope.com)。 -
選項C 反應後產生黃色複合物可供偵測
Biuret反應生成紫色至紫紅色配合物(吸收波長約540–560 nm),非黃色([biologymanual.commons.gc.cuny.edu](https://biology
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