111年:(醫檢)檢驗(2)
進行雜交試驗（ hybridization ）時，下列何種條件最能容許探針與待測序列之鹼基配對錯誤的存在？
A低鹽類濃度、低濃度甲醯胺（ formamide）、低溫
B高鹽類濃度、高濃度甲醯胺（ formamide）、高溫
C高鹽類濃度、低濃度甲醯胺（ formamide）、低溫
D低鹽類濃度、高濃度甲醯胺（ formamide）、低溫
詳細解析
本題觀念：
探討 nucleic acid 雜交（hybridization）時，如何利用鹽濃度、formamide 濃度與溫度來調控“雜交嚴格性”（stringency），進而允許或排除探針（probe）與待測序列之間的鹼基配對錯誤（mismatch）。
選項分析
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選項A：低鹽、低 formamide、低溫
• 低鹽會提高嚴格性，但低 formamide 與低溫則降低嚴格性。
• 溫度低、formamide 少時，探針與主鏈的氫鍵易形成，容許更多 mismatch，屬於低嚴格性。但若同時低鹽（高嚴格性），二項互相抵銷，嚴格性不至最低，故非最能容錯。 (aatbio.com) -
選項B：高鹽、高 formamide、高溫
• 高 formamide 與高溫都提高嚴格性；高鹽則降低嚴格性。
• 兩者提高嚴格性的效果大於高鹽降低的效果，整體屬於高—中等嚴格性，容錯度不高。 ([patents.justia.com](https://patents.justia.com/patent/2017
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