111年:(醫檢)檢驗(2)
萃取 RNA並稀釋 10 倍後,在 260 nm 測得的吸光值為 0.5 ,則此檢體濃度為何?
A100 μg/mL
B200 μg/mL
C300 μg/mL
D400 μg/mL
詳細解析
本題觀念:
本題考核利用紫外光度法(UV spectrophotometry)測定RNA濃度的原理。依據Beer–Lambert法則,溶液在260 nm的吸光度與核酸濃度成正比,且RNA在260 nm具有固定的摩爾消光係數(extinction coefficient),常用換算係數為1 A260 unit對應40 μg/mL RNA,須考慮稀釋倍數後還原原始樣本濃度。
選項分析
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選項A 100 μg/mL
稀釋後吸光度0.5對應20 μg/mL(0.5×40),再乘以10倍稀釋因子得200 μg/mL,不是100 μg/mL,故排除。 -
選項B 200 μg/mL
稀釋後吸光度0.5對應20 μg/mL,乘以10倍稀釋因子正好200 μg/mL,符合計算結果,為正確答案。 -
選項C 300 μg/mL
與正確計算值200 μg/mL不符,排除。 -
選項D 400 μg/mL
與正確計算值200 μg/mL差距過大,排除。
答案解析
依Beer–Lambert定律:A = ε·C·l,其中A為吸光度、ε為消光係數、C為濃度、l為光徑長(1 cm)。
RNA在260 nm的消光係數換算:1 A260 unit = 40 μg/mL RNA ([mpbio.com](https://
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