操作 sandwich ELISA 時，通常以順序式（ sequential mode ）執行，可能的好處為下列何者？

本題觀念：

本題考察 sandwich ELISA（夾心型酵素免疫反應）在操作上可採 simultaneous（一次混合）或 sequential（分步驟）兩種模式，重點在於 sequential 模式如何影響 assay 的動態範圍及避免 high-dose hook effect（鉤狀效應，亦稱 prozone effect）。

選項分析

• 選項A 避免鉤狀效應
  Sandwich immunoassay 若一次同時加入樣本抗原與標記抗體（one-step/ simultaneous），高濃度抗原會同時飽和固相捕捉抗體及標記抗體，導致無法形成完整「抗體–抗原–標記抗體」夾心結構，反應訊號反而下降（鉤狀效應），造成偽陰性或偽低值。採 sequential（two-step）模式，先讓抗原單獨與固相捕捉抗體結合並洗去過量抗原後，再加入標記抗體，可有效降低該效應發生機率，維持線性量測範圍 (clinical-laboratory-diagnostics.com)。
• 選項B 降低操作的失誤
  Sequential 模式步驟較多（需額外洗滌與分步加入試劑），反而增加操作複雜度與出錯

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