111年:(醫檢)檢驗(1)
關於聚合酶連鎖反應-限制酶片段長度多型性分析( PCR-RFLP )法,下列敘述何者正確?
A先對單一特定基因進行增幅,再使用限制酶對產物進行切割的方法
B染色體先進行限制酶切割後,以不同的 adaptor DNA 接合,再以引子結合 adaptor DNA 的部分進行增幅的方法
C針對隨機重複序列( tandem repeat sequence )進行增幅的方法
D進行多個隨機重複序列( tandem repeat sequence )增幅的分析法
詳細解析
本題觀念:
PCR-RFLP(Polymerase Chain Reaction–Restriction Fragment Length Polymorphism)結合 PCR 與限制酶切割分析:先針對特定基因序列以 PCR 擴增,隨後利用限制性內切酶酶切擴增後的產物,最後以電泳分離並分析切割片段長度的多型性,達到基因分型或突變鑑定之目的 (biodiscover.com)。
選項分析
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選項A
先對單一特定基因進行增幅,再使用限制酶對產物進行切割。此即 PCR-RFLP 的標準流程:PCR 擴增 → 限制酶消化 → 電泳分析,與題意完全吻合 (biodiscover.com)。 -
選項B
描述先以限制酶切割全基因組 DNA,再接上 adaptor 後以結合 adaptor 的引子進行 PCR 擴增。此法為 AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism),擴增片段長度多型性分析的特徵步驟 ([tsu.tw](
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