111年:(醫檢)檢驗(1)
關於檢測血漿中第一型人類免疫缺乏病毒之核酸增幅試劑中 AmpErase ( uracil-N-glycosylase )的敘述,下列何者錯誤?
A熱穩定性低
B破壞含去氧尿嘧啶核苷( deoxyuridine )的擴增子( amplicon )
C增加核酸增幅的效率
D避免污染
詳細解析
本題觀念:
本題考慮的是 PCR 反應中因前次擴增產物(amplicon)殘留所致的 carry-over contamination 控制技術。AmpErase 即是利用 heat-labile uracil-N-glycosylase (UNG) 配合將 dUTP 取代 dTTP,於 PCR 起始前先行消化含 uracil 的殘留 amplicon,再藉高溫失活 UNG,以避免假陽性。
選項分析
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選項 A:熱穩定性低
Uracil-DNA glycosylase 必須在加熱過程中完全失活,才能避免在 PCR 進行期干擾擴增。以 Antarctic Thermolabile UDG 為例,50°C 即可完全不可逆地失活,屬 heat-labile 酵素,故「熱穩定性低」正確 (neb.com) (sbsgenetech.com)。 -
選項 B:破壞含 deoxyuridine 的擴增子
U
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