111年:(醫檢)檢驗(1)
下圖為以聚合酶連鎖反應檢測水泡液中腸病毒（ enterovirus, EV ）的電泳分析結果。關於此檢驗的結果判讀，下列何者最不適當？
A是巢式反轉錄聚合酶連鎖反應的結果
B泛腸病毒引子是針對腸病毒低保守區域設計的
C對照組 1是陽性對照組
D對照組 2及檢體有添加內部控制（ internal control ） DNA
詳細解析
本題觀念
本題主要在考察以巢式（nested）反轉錄聚合酶連鎖反應（RT-PCR）檢測腸病毒（enterovirus, EV）時，對第一輪與第二輪PCR產物、引子設計（primer design）、內部控制（internal control）及對照組（controls）之解讀。
影像分析
影像分為兩個泳道群組，左側為第一輪PCR產物，右側為第二輪巢式PCR產物。
• 第一輪PCR（PAN1/PAN2；ICF/ICR）
– M：DNA分子量標誌，可見常見階梯條帶。
– C1：出現約347 bp的條帶，未見196 bp條帶。
– C2、C3：C2僅見約196 bp條帶；C3無明顯條帶。
– S1–S5：各檢體樣本均出現約196 bp條帶，部分樣本（如S3、S5）另有347 bp條帶。
註記中：347 bp為泛腸病毒第一輪目標產物大小，196 bp為內部控制（IC）產物大小。
• 第二輪PCR（EVSP1/EVSP2）
– 期望產物為約260 bp。
– C1：無260 bp條帶（因第二輪對陽性對照可能未配置EV特異引子）；
– C2、C3：均無260 bp條帶；
– S1、S3、S5：分別出現明顯260 bp條帶，顯示有EV陽性。
此圖呈現典型的巢式RT-PCR檢驗流程：
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