111年:(醫檢)檢驗(1)
致癌基因的基因擴增（ amplification ）常是造成癌症的重要因素，下列何種方法最不適合應用於檢驗「基因擴增」？
A螢光原位雜交法（ FISH ）
B即時定量聚合酶連鎖反應（ Real-time Q-PCR ）
C次世代定序（ Next-generation sequencing, NGS ）
D桑格定序法 （ Sanger sequencing ）
詳細解析
本題觀念：
本題聚焦於癌症中致癌基因擴增（oncogene amplification）屬於一種拷貝數變異（copy number alteration, CNA），其檢測依賴於定量或可視化特定基因序列的技術，包括螢光原位雜交（FISH）、Real-time qPCR、次世代定序（NGS）等，而桑格定序（Sanger sequencing）因僅提供序列核苷酸信息，且對大片段或高倍數的基因拷貝數增加無法定量，故最不適合用於基因擴增的檢測。
選項分析
-
選項A 螢光原位雜交法（FISH）
FISH 利用帶螢光訊號的探針與目標 DNA 片段雜交，可在細胞層面直接計數特定基因或染色體標記的訊號數量。臨床上廣泛應用於檢測 HER2、MYCN 等致癌基因擴增，能顯示擴增的異質性及放大單位（如 double minutes、HSRs）(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。 -
選項B 即時定量聚合酶鏈鎖反應（Real-time Q-PCR）
Real-time qPCR 採用標準曲線或 ΔΔCt 方法，將目標基因與單拷貝參考基因相比較，可精準定量單一或少數基因的拷貝數改變。多項文獻證實 qPCR 可於少量 FFPE 樣本
...（解析預覽）...