下圖所示為測試聚合酶鏈鎖反應（ PCR ）中最佳黏合（ annealing ）溫度之電泳分析， 1 至 10 代表不同的黏合溫度，箭號代表預期 PCR 產物正確大小位置，下列敘述何者較符合由 1 至 10 溫度變化的順序？

本題觀念：

聚合酶鏈鎖反應（PCR）中，聚合酶能否正確延伸取決於引子（primer）與模板（template）的退火（annealing）溫度。退火溫度過低時，引子易與非目標序列錯配，產生多條非特異性產物；退火溫度過高時，引子無法有效與目標序列結合，導致不產生或產量極低的擴增產物；只有在接近引子熔解溫度（Tm）附近的最佳退火溫度時，才能兼顧特異性與產量，得到單一、明顯的正確大小產物 (en.wikipedia.org)。

影像分析：

電泳膠上標示 1 至 10 的跑道代表不同退火溫度條件。觀察到：

• 跑道 1～3：在箭頭所指的正確產物位置附近，可見多條條帶，且底部或上游區域出現許多非特異性產物與擴增條帶，顯示退火溫度過低，特異性不足。
• 跑道 4～7：只有一條集中在箭頭所示位置的清晰、強度明顯的單一帶，代表在這些條件下達到最佳退火溫度，兼顧產量與特異性。
• 跑道 8～10：正確產物條帶逐漸減弱，最後幾條跑道幾乎不見任何條帶，說明退火溫度過高，引子無法有效結合，擴增效率下降至幾乎零 ([biochemicalsci.com](https://www.biochemi

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