如果想要將一特定基因的單股多聚核苷酸（ polynucleotide ）製作成偵測此特定基因的探針（ probe），通常會利用多聚核苷酸激酶（ polynucleotide kinase ）在其5'端標記具有放射性的32P，進行該反應時，需加入下列何種32P-dATP材料來進行標記？

本題觀念：

本題的核心觀念在於多聚核苷酸激酶 (Polynucleotide Kinase, PNK) 的酵素反應機制，特別是用於核酸 5' 端放射性標記 (5' End Labeling) 時的磷酸根轉移位置。

選項分析

• A. $\alpha$-$^{32}\text{P}$-dATP (錯誤)：
  • $\alpha$ (Alpha) 磷酸根是直接連接在核糖 (sugar) 上的磷酸基團。
  • 當使用 DNA 聚合酶 (DNA Polymerase) 進行反應（如 PCR、Nick translation 或 Random priming）時，核苷酸會被整合進 DNA 鏈中，此時 $\alpha$-磷酸根會成為磷酸二酯鍵 (phosphodiester bond) 的一部分，而 $\beta$ 和 $\gamma$ 磷酸根會以焦磷酸 (Pyrophosphate) 的形式釋出。
  • 因此，$\alpha$-$^{32}\text{P}$ 標記主要用於內部標記 (Internal labeling) 或使用末端轉移酶 (Terminal Transferase) 的 3' 端標記。若用於 PNK 反應，放射性的 $\alpha$ 磷酸根會留在 ADP/dADP 上，無法轉移至探針

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