114年:醫學一(1)
在進行重組 DNA實驗時,常需使用可接入選殖 DNA片段的選殖質體( cloning plasmids ),下列關於此選殖質體的敘述何者正確?
A在大腸桿菌內進行 DNA複製(replication )時,此環狀質體( circular plasmids )不需要複製起點 (origin of replication )
B經常可用來選殖超過 50×103 鹼基對( base pairs )的外來 DNA片段
C通常需要具有抗生素抗藥性基因( antibiotic resistance gene )提供篩選的標記
D需要環化重組酶( Cre recombinase )協助外來 DNA片段插入
詳細解析
本題觀念:
本題考查**重組 DNA 技術(Recombinant DNA Technology)中,作為載體(Vector)的選殖質體(Cloning Plasmid)**之基本構造與功能特性。 一個標準的選殖質體通常包含三個核心要素:
- 複製起點(Origin of Replication, ori):確保質體能在宿主細胞(如 E. coli)內獨立複製。
- 篩選標記(Selectable Marker):通常是抗生素抗藥性基因,用以篩選出成功攝入質體的宿主細胞。
- 多重選殖位(Multiple Cloning Site, MCS):含有多個限制酶切位,供外來 DNA 插入。
選項分析
- A. 在大腸桿菌內進行 DNA 複製(replication)時,此環狀質體(circular plasmids)不需要複製起點(origin of replication)
- 錯誤。
- **複製起點(ori)**是質體 DNA 複製的起始序列,它會招募宿主細胞的複製蛋白(如 DNA polymerase)來啟動複製。如果質體缺乏 ori,進入宿主細胞後將無法複製,並隨著細胞分裂而丟失(diluted out)。因此,ori 是質體在宿主內維持與遺傳的必要條件。
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