Clauss fibrinogen assay 主要是使用下列何者來檢驗 fibrinogen ？

本題觀念：

Clauss Fibrinogen Assay（Clauss 法纖維蛋白原測定）

Clauss 法是目前臨床檢驗室測定功能性纖維蛋白原 (Functional Fibrinogen) 的黃金標準方法。其核心原理是利用過量的高濃度凝血酶 (Thrombin) 加入稀釋後的受檢血漿中，將纖維蛋白原 (Fibrinogen) 轉化為纖維蛋白 (Fibrin)。

在此反應條件下，凝血酶的濃度極高，使得反應速率僅取決於「纖維蛋白原的濃度」（即 Fibrinogen 為速率限制因子）。測得的凝固時間 (Clotting time) 與血漿中的纖維蛋白原濃度成反比（凝固時間越短，濃度越高）。

選項分析

• A. prothrombinase (凝血酶原酶複合物)：
  • 錯誤。Prothrombinase 並非試劑，而是體內凝血連鎖反應中形成的複合物，由 Factor Xa、Factor Va、磷脂質 (Phospholipids) 和鈣離子 (Ca²⁺) 組成。它的功能是將凝血酶原 (Prothrombin, Factor II) 切割活化為凝血酶 (Thrombin)。Clauss 法是直接加入外源性凝血酶，因此不需要 Prothrombinase 的參與。
• B. factor IXa：
  • 錯誤。Factor IXa 是內源性路徑 (Intrinsic pathway) 的一部分，與 Factor VIIIa 形成複合物來活化 Factor X。Clauss 法直接作用於凝血路徑的最末端（Fibrinogen -> Fibrin），跳過了內源性與外源性路徑的所有上游因子。
• C. thrombin (凝血酶)：
  • 正確。Clauss 法的試劑主要成分就是高濃度的 Thrombin (通常約 100 NIH U/mL，常為牛來源或人重組來源)。
  • 理由：直接加入 Thrombin 可以繞過所有上游凝血因子 (如 FVII, FX, FV, FIX 等) 的影響，亦即該測試不受檢體中其他凝血因子缺乏或不足的干擾，專一性地測量 Fibrinogen 轉變為 Fibrin 的能力。
• D. factor Xa：
  • 錯誤。Factor Xa 是共同路徑的起始因子，負責活化 Prothrombin 成為 Thrombin。某些抗凝血藥物監測（如 Anti-Xa assay）會使用 Factor Xa，但測定 Fibrinogen 的 Clauss 法並不使用此因子。

答案解析

正確答案：C (thrombin)

Clauss 法的設計是為了排除外源性與內源性路徑中其他凝血因子的干擾，直接評估纖維蛋白原的功能。

1. 檢體處理：將病人血漿進行稀釋（通常為 1:10），目的是減少血漿中抗凝物質（如 FDPs, Heparin）的干擾。
2. 試劑添加：加入過量的 Thrombin 試劑。
3. 反應機制：Thrombin 切割 Fibrinogen 的 Aα 和 Bβ 鏈，釋放出 Fibrinopeptide A 和 B，形成 Fibrin monomer，進而聚合形成凝塊。
4. 結果判讀：在高濃度 Thrombin 存在的條件下，凝固時間 (Clotting Time) 與 Fibrinogen 濃度成反比關係（濃度越高，凝固越快）。透過標準檢體製作的檢量線 (Standard Curve) 換算出病人數值。

相較之下，若使用 PT-derived method (由 PT 檢測演算推導)，則是使用 Thromboplastin (含 Tissue Factor)，其數值易受其他凝血因子異常或發炎反應干擾，且無法準確偵測「異常纖維蛋白原血症 (Dysfibrinogenemia)」。

核心知識點

1. Fibrinogen (Factor I)：

   • 由肝臟合成，是凝血連鎖反應的最終受質。
   • 參考區間通常為 200-400 mg/dL (2.0-4.0 g/L)。
   • 危急值：< 100 mg/dL (出血風險高)。

2. Clauss 法 vs. PT-derived 法：

   • Clauss 法：測量「功能性」Fibrinogen。是診斷 Dysfibrinogenemia (量正常但功能異常) 的首選，此時 Clauss 法數值會低於免疫法或 PT-derived 法。
   • PT-derived 法：基於 PT 反應的光學吸光度變化推算，屬於「物理量/抗原量」估算，對於 Dysfibrinogenemia 會高估數值（偽陰性）。

3. 干擾因素：

   • 雖然 Clauss 法會稀釋血漿以抗干擾，但極高濃度的 FDPs (如 DIC 晚期) 或極高劑量的 Heparin 仍可能延長反應時間，導致 Fibrinogen 數值被低估。
   • Afibrinogenemia (無纖維蛋白原血症) vs. Hypofibrinogenemia (低纖維蛋白原血症)。

4. 臨床應用：

   • DIC (散播性血管內凝血) 的消耗性指標。
   • 溶栓治療監測。
   • 肝衰竭評估。

參考資料

1. National Center for Biotechnology Information (NCBI) - Comparison of the fibrinogen Clauss assay and the fibrinogen PT derived method. Link
2. Practical Haemostasis - Clauss Fibrinogen Assay Principle and Method. Link
3. LearnHaem - Clauss Fibrinogen Assay. Link