關於hybridization 相關技術的比較，下列何者最正確？

本題觀念：

本題主要測驗考生對於分子生物學中各種轉漬（Blotting）與雜交（Hybridization）技術的原理及其「被檢測物（Target）」與「探針（Probe）」對應關係的掌握度。每一種 Blotting 技術的命名（東西南北）通常對應特定的分子交互作用組合。

選項分析

• A. Northern blot 被檢測物是 RNA，探針是 protein：

  • 錯誤。
  • Northern blot 的被檢測物（Target）是 RNA（通常是 mRNA），利用瓊脂膠電泳分離。
  • 探針（Probe）則是具有互補序列的 DNA 或 RNA（核酸），而非蛋白質。它是利用核酸序列的互補性（Hybridization）來進行檢測。

• B. Eastern blot 被檢測物是 protein，探針是 DNA：

  • 錯誤。
  • Eastern blot 的定義在學術界不如其他三者統一，但最常被定義為檢測蛋白質的轉譯後修飾（Post-translational modifications, PTMs），如醣基化（Glycosylation）、脂質化等。
  • 其被檢測物是 Protein，但探針通常是凝集素（Lectin）、特定的化學受質或針對修飾基團的特異性抗體，而非 DNA。
  • 註：若被檢測物是 Protein 且探針是 DNA，專有名詞應為 Southwestern blot。

• C. Western blot 被檢測物是 protein，探針是 DNA：

  • 錯誤。
  • Western blot 的被檢測物（Target）是 Protein。
  • 探針（Probe）是抗體（Antibody），即利用抗原-抗體（Antigen-Antibody）的專一性結合來檢測特定蛋白質，而非使用 DNA。

• D. Southwestern blot 被檢測物是 protein，探針是 DNA：

  • 正確。
  • Southwestern blot 結合了 Southern blot（DNA 檢測）與 Western blot（蛋白質檢測）的特點。
  • 其被檢測物（Target）是 DNA 結合蛋白（DNA-binding proteins），經 SDS-PAGE 分離後轉漬到膜上。
  • 探針（Probe）則是帶有放射性或標記的雙股 DNA 片段，用來篩選能與特定 DNA 序列結合的蛋白質（如轉錄因子）。

答案解析

正確答案為 (D)。 Southwestern blot 專門用於研究 DNA 與蛋白質之間的交互作用，其技術原理就是將蛋白質（Target）轉漬到膜上，並使用特定的 DNA 序列（Probe）進行雜交，以檢測該蛋白質是否具有結合特定 DNA 的能力。

核心知識點

考生應熟記以下四大 Blotting 技術的對應關係表（口訣：SNoW DRoP）：

技術名稱 (Blot)	被檢測物 (Target)	探針 (Probe)	檢測原理 / 應用
Southern	DNA	DNA / RNA	核酸互補雜交 (Hybridization)，檢測基因存在、缺失或重組。
Northern	RNA	DNA / RNA	核酸互補雜交，檢測基因表現量 (mRNA)。
Western	Protein	Antibody (蛋白質)	抗原-抗體結合，檢測特定蛋白質表現。
Southwestern	Protein	DNA	蛋白質-DNA 結合，檢測 DNA 結合蛋白 (如 Transcription factors)。
Eastern	Protein	Lectin / Specific Stain	檢測蛋白質轉譯後修飾 (如醣基化、脂質化)。

參考資料

1. Southwestern blot - Wikipedia
2. Western vs. Southern vs. Northern Blots: Key Differences - Excedr
3. Eastern blot - Wikipedia