在細菌分子鑑定的確認試驗或追加試驗中，下列何種方式最能提高陽性或陰性預測值？

本題觀念：

本題考查的是**分子診斷中的確認試驗策略（Confirmatory Testing Strategy）以及其對預測值（Predictive Value）**的影響。

在醫學檢驗中，當初篩檢驗（Screening Test）呈現陽性時，為了排除假陽性（False Positive）並提高結果的可信度，通常需要進行確認試驗。分子鑑定（如 PCR）中，單一標的基因（Target Gene）可能會因為與非目標菌株的序列相似（Cross-reactivity）或非特異性擴增而導致假陽性。

選項分析

• A. 同一檢體使用同一試驗再重複一次

  • 分析：這是評估檢測**精密度（Precision）或重複性（Repeatability）**的方法。如果第一次結果是假陽性（例如因為引子對與非目標菌株有交叉反應），重複做同樣的試驗通常會得到相同的錯誤結果（系統性誤差）。
  • 結論：無法有效提高陽性預測值（PPV）。

• B. 同一檢體試驗不同的檢測標的

  • 分析：這是分子診斷中標準的確認策略。
  • 理由：不同的基因標的（Target）具有獨立的遺傳序列。如果一個檢體同時對兩個不同的特異性基因（例如：細菌的 16S rRNA 加上物種特異性基因如 tuf 或毒素基因）皆呈現陽性，則發生隨機假陽性或交叉反應的機率極低。這能顯著提高檢測的特異性（Specificity）。
  • 統計學關聯：根據貝氏定理，特異性的提高會直接顯著提升陽性預測值（PPV）。同理，若雙標的皆為陰性，也能提高陰性預測值（NPV）。
  • 結論：這是最能提高預測值的方式。

• C. 同一檢體由不同人操作試驗

  • 分析：這是評估再現性（Reproducibility）或排除人為操作誤差的方法。雖然可以減少因操作不當導致的錯誤，但無法解決檢驗方法本身的限制（如引子特異性不足）。
  • 結論：對預測值的提升有限。

• D. 同一檢體不同天再進行一次試驗

  • 分析：這是評估**中間精密度（Intermediate Precision）或日間變異（Day-to-day variation）**的方法。與選項 A 類似，如果是方法學本身的特異性問題，隔天重做通常還是會得到相同結果。
  • 結論：無法根本性解決假陽性問題。

答案解析

正確答案：B

在分子細菌鑑定中，為了確保結果的準確性，常採用「多標的策略（Multi-target strategy）」。例如，在檢測 Neisseria gonorrhoeae 時，初篩可能針對 cryptic plasmid，但確認試驗會針對另一個獨立的基因（如 porA pseudogene 或 16S rRNA），因為非致病性的奈瑟氏菌極不可能同時攜帶這兩個獨立的標的序列。因此，使用不同的檢測標的能最大程度地增加特異性，進而提高陽性預測值，確保診斷的正確性。

核心知識點

1. 分子診斷確認原則：單一基因檢測陽性後，建議使用不同基因標的或**定序（Sequencing）**進行確認，以排除非特異性擴增。
2. 流行病學指標：
   • 陽性預測值（PPV）：檢測陽性者中，真正患病的比例。與**特異性（Specificity）**高度相關。
   • 確認試驗目的：主要在於提高特異性，從而最大化 PPV。
3. 臨床實例：
   • COVID-19：同時檢測 N gene 與 ORF1ab/E gene。
   • 結核分枝桿菌（MTB）：檢測 IS6110 外，有時需搭配 16S rRNA 或 rpoB 基因確認。
   • 淋病雙球菌（NG）：需雙標的確認以避免與其他口咽部奈瑟氏菌（Commensal Neisseria）交叉反應。

參考資料

1. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) MM03: Molecular Diagnostic Methods for Infectious Diseases. (指引中強調確認試驗需使用不同標的或方法)
2. Sensitivity, Specificity and Predictive Values of Molecular and Serological Tests for COVID-19 - PMC (討論多基因標的對診斷準確度的提升)
3. Centers for Disease Control and Prevention (CDC): Recommendations for the Laboratory-Based Detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae (明確建議使用不同標的進行確認試驗)