下列何者試驗與黴漿菌最無關？

本題觀念：

本題主要考查 黴漿菌 (Mycoplasma) 的鑑定特性與鑑別試驗，並需區分其他細菌（如嗜血桿菌）的專屬試驗。黴漿菌是目前發現最小的可自我複製生物，缺乏細胞壁，因此對盤尼西林具抗性，且在人工培養基上生長緩慢，需要特殊的營養需求（如膽固醇）。

選項分析

• A. PPLO培養基生長 (Correctly Related)：

  • 分析：PPLO 是 "Pleuropneumonia-like organisms" 的縮寫，這是黴漿菌的舊稱。PPLO 瓊脂 (PPLO agar) 是培養黴漿菌的標準基礎培養基，通常需添加血清 (提供膽固醇/sterols)、酵母萃取液 (提供核酸前驅物) 和盤尼西林 (抑制其他細菌)。
  • 結果：黴漿菌在 PPLO 培養基上會形成典型的「荷包蛋樣 (fried egg)」菌落（M. pneumoniae 除外，其菌落通常呈桑葚狀且無明顯荷包蛋外觀），此選項與黴漿菌密切相關。

• B. hemadsorption test (Correctly Related)：

  • 分析：血球吸附試驗 (Hemadsorption test) 是鑑定 肺炎黴漿菌 (Mycoplasma pneumoniae) 的重要特性。M. pneumoniae 的菌落能夠吸附天竺鼠 (guinea pig) 或其他哺乳動物的紅血球。這是因為該菌具有特殊的蛋白質 (如 P1 adhesin)，能與紅血球表面的唾液酸受器結合。
  • 結果：此試驗常用於區分致病性的 M. pneumoniae (陽性) 與其他非致病性黴漿菌，故與黴漿菌相關。

• C. tetrazolium test (Correctly Related)：

  • 分析：四唑還原試驗 (Tetrazolium reduction test) 利用某些黴漿菌（特別是 M. pneumoniae）具有將無色的四唑鹽 (Tetrazolium salts, 如 TTC) 還原成紅色的 Formazan 之能力。
  • 結果：這可用於觀察菌落生長或作為鑑別試驗。例如，M. pneumoniae 具有還原 Tetrazolium 的能力，這有助於將其與其他黴漿菌區分，故此選項相關。

• D. porphyrin test (Least Related)：

  • 分析：紫質試驗 (Porphyrin test)，又稱為 $\delta$-aminolevulinic acid (ALA) 試驗，是專門用於鑑定 嗜血桿菌屬 (Haemophilus spp.) 的試驗。
  • 原理：此試驗用來檢測細菌是否具有合成 X 因子 (Hemin) 的能力。若細菌具有合成酶，能將 ALA 轉化為 Porphyrins (紫質)，在紫外線下會發出橘紅色螢光（代表不需外加 X 因子，如 H. parainfluenzae）；若為陰性則代表需要外加 X 因子（如 H. influenzae）。
  • 結果：此試驗與黴漿菌的鑑定無關。

答案解析

正確答案：D 選項 A、B、C 均為黴漿菌的培養條件或常用生化鑑定方法。唯獨 D 選項 (porphyrin test) 是用於檢測細菌是否能自行合成 X 因子 (Hemin) 的試驗，主要應用於 嗜血桿菌 (Haemophilus) 的鑑別（區分 H. influenzae 與 H. parainfluenzae），與黴漿菌無關。

核心知識點

1. 黴漿菌 (Mycoplasma) 特性：

   • 缺乏細胞壁：對 β-lactam 類抗生素 (Penicillin, Cephalosporin) 具抗性；革蘭氏染色無效。
   • 培養基：需使用含血清 (提供 Sterols/Cholesterol) 的 PPLO agar。
   • 菌落外觀：典型為「荷包蛋 (Fried egg)」外觀（M. pneumoniae 除外，呈桑葚狀）。
   • 關鍵鑑別試驗：
     • Hemadsorption (血球吸附)：M. pneumoniae (+)。
     • Tetrazolium reduction (四唑還原)：M. pneumoniae (+)。
     • Glucose fermentation (葡萄糖發酵)：M. pneumoniae (+)。
     • Arginine hydrolysis (精胺酸水解)：M. hominis (+)。
     • Urease (尿素酶)：Ureaplasma urealyticum (+) (黴漿菌屬通常為陰性)。

2. 嗜血桿菌 (Haemophilus) 特性：

   • X 因子 (Hemin) 與 V 因子 (NAD) 的需求。
   • Porphyrin test (ALA test)：
     • 陽性 (發螢光)：不需 X 因子 (如 H. parainfluenzae)。
     • 陰性 (無螢光)：需要 X 因子 (如 H. influenzae)。

參考資料

1. Porphyrin Test - Microbe Notes - 解釋 Porphyrin test 用於 Haemophilus 鑑定。
2. Mycoplasma pneumoniae Identification - Clinical Microbiology Procedures Handbook - 確認 Hemadsorption 和 Tetrazolium reduction 用於黴漿菌鑑定。
3. PPLO Agar for Mycoplasma - 確認 PPLO agar 用途。