下圖為培養液微量稀釋法部分截圖， 1～4的抗生素濃度分別為 1、2、4及8 μg/mL。1與2表示有細菌生長，3與4表示無細菌生長，則此藥的最小抑菌濃度為何？

本題觀念：

最小抑菌濃度 (Minimum Inhibitory Concentration, MIC) 本題考查的是抗生素感受性試驗中「培養液微量稀釋法 (Broth Microdilution Method)」的判讀原則。

• 定義：MIC 是指在特定條件下（通常為 35±2°C 培養 16-20 小時），能抑制細菌出現肉眼可見生長 (visible growth) 的最低抗生素濃度。
• 判讀標準：
  • 混濁 (Turbidity) / 沉澱 (Pellet)：代表有細菌生長 (+)。
  • 澄清 (Clear) / 無沉澱：代表細菌生長受抑制 (-)。
  • MIC 數值：由低濃度往高濃度觀察，第一個出現「無細菌生長（澄清）」的濃度即為 MIC。

影像分析：

題目提供的圖片與文字描述對應如下：

1. 1 號孔 (1 μg/mL)：圖片顯示黑色實心圓（代表混濁/沉澱），文字說明「有細菌生長」。
2. 2 號孔 (2 μg/mL)：圖片顯示黑色實心圓，文字說明「有細菌生長」。
3. 3 號孔 (4 μg/mL)：圖片顯示白色空心圓（代表澄清），文字說明「無細菌生長」。這是第一個抑制細菌生長的濃度。
4. 4 號孔 (8 μg/mL)：圖片顯示白色空心圓，文字說明「無細菌生長」。雖能抑制細菌，但濃度高於 4 μg/mL。

選項分析

• A. 1 μg/mL：此濃度下觀察到細菌生長（黑色圓點），表示藥物濃度不足以抑制細菌，故不是 MIC。
• B. 2 μg/mL：此濃度下仍觀察到細菌生長，表示藥物尚未達到抑菌效果，故不是 MIC。
• C. 4 μg/mL：此為最低且無細菌生長的濃度。與前一孔 (2 μg/mL) 相比，細菌生長狀態由「有」轉變為「無」，符合 MIC 的定義。
• D. 8 μg/mL：此濃度雖然也無細菌生長，但 MIC 定義為「最小」抑菌濃度。既然 4 μg/mL 已經有效，8 μg/mL 就不是「最小」值。

答案解析

根據 CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) 標準與 MIC 定義，MIC 值應判讀為完全抑制微生物肉眼可見生長的最低抗生素濃度。 在本題序列中：

• 1 μg/mL (+)
• 2 μg/mL (+)
• 4 μg/mL (-) <-- 第一個抑制點
• 8 μg/mL (-)

因 4 μg/mL 是造成無細菌生長的最低濃度，故正確答案為 (C) 4 μg/mL。

核心知識點

1. MIC vs MBC：
   • MIC (Minimum Inhibitory Concentration)：抑制可見生長的最低濃度（判讀澄清/混濁）。
   • MBC (Minimum Bactericidal Concentration)：殺死 99.9% 細菌的最低濃度（需將 MIC 試管液體轉種至平板培養確認）。通常 MBC ≥ MIC。
2. 判讀口訣：「由低往高看，第一個變清」。
3. 跳孔現象 (Skipped Wells)：若低濃度無生長，高濃度卻有生長（例如 1(-), 2(+), 4(-)），則實驗結果無效，需重做。本題數據連續（由長變不長），結果有效。

參考資料

1. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). M07: Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically.
2. Wiegand I, et al. Agar and broth dilution methods to determine the minimal inhibitory concentration (MIC) of antimicrobial substances. Nat Protoc. 2008.