115年:(醫檢)微生(1)
下列何種試驗與檢測細菌發酵葡萄糖能力無關?
AKligler iron agar
Bindole test
Cmethyl red test
DVoges-Proskauer test
詳細解析
本題觀念:
本題考查細菌生化試驗的原理,特別是區分「碳水化合物(醣類)代謝」與「胺基酸代謝」的試驗。細菌鑑定中常用的 IMViC 試驗與多醣鐵瓊脂(KIA/TSI)是醫事檢驗師國考的重點,考生需清楚每一項試驗的受質(Substrate)、酵素(Enzyme)與產物(Product)。
選項分析
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A. Kligler iron agar (KIA):有關
- 原理:KIA 含有葡萄糖(0.1%)與乳糖(1%)。細菌若能發酵葡萄糖,會產生酸,使底層(Butt)的酚紅指示劑變黃。
- 結論:此試驗直接檢測細菌發酵葡萄糖(與乳糖)產酸的能力。
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B. indole test (吲哚試驗):無關
- 原理:檢測細菌是否具有 Tryptophanase(色胺酸酶),能將 Tryptophan(色胺酸,一種胺基酸) 分解為 Indole(吲哚)、Pyruvate(丙酮酸)與 Ammonia(氨)。
- 檢測方式:加入 Kovac's reagent 或 Ehrlich's reagent,若有 Indole 存在會產生紅色複合物。
- 結論:此試驗檢測的是「胺基酸(色胺酸)的代謝能力」,而非葡萄糖發酵能力。事實上,進行 Indole test 時,培養基中通常不應含有葡萄糖,因為葡萄糖發酵產生的酸可能會抑制 Tryptophanase 的活性或干擾 Indole 的檢測。
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C. methyl red test (MR test):有關
- 原理:檢測細菌是否能經由 Mixed acid fermentation(混合酸發酵路徑) 發酵 葡萄糖。
- 結果:細菌發酵葡萄糖產生大量且穩定的有機酸(如乳酸、醋酸、甲酸),使培養基 pH 值降至 4.4 以下,加入 Methyl red 指示劑後呈現紅色(陽性)。
- 結論:此試驗是用來檢測葡萄糖發酵的特定路徑。
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D. Voges-Proskauer test (VP test):有關
- 原理:檢測細菌是否能經由 Butylene glycol pathway(丁二醇發酵路徑) 發酵 葡萄糖。
- 結果:細菌發酵葡萄糖產生中性代謝中間產物 Acetoin(乙醯甲基甲醇),加入 KOH 與 -naphthol 後會轉變為紅色複合物。
- 結論:此試驗也是用來檢測葡萄糖發酵的特定路徑。
答案解析
題目詢問何者與「檢測細菌發酵葡萄糖能力」無關。
- KIA、MR test、VP test 的生化反應基礎皆直接源於細菌對 葡萄糖 (Glucose) 的利用與發酵(產酸或產 Acetoin)。
- Indole test 的生化反應基礎源於對 色胺酸 (Tryptophan) 的降解,屬於蛋白質/胺基酸代謝試驗,與醣類發酵無關。
故正確答案為 (B) indole test。
核心知識點
醫檢師國考中,細菌生化試驗的「受質-酵素-產物」對應關係是必考題:
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醣類代謝試驗(受質皆含葡萄糖):
- MR test:混合酸路徑 (Mixed acid pathway) 強酸 (pH < 4.4)。
- VP test:丁二醇路徑 (Butylene glycol pathway) Acetoin (中性產物)。
- KIA/TSI:發酵葡萄糖/乳糖/蔗糖 酸 (黃色);產氣;產 。
- O/F test:區分氧化 (Oxidation) 與發酵 (Fermentation)。
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胺基酸/蛋白質代謝試驗:
- Indole test:受質為 Tryptophan Indole。
- Phenylalanine Deaminase (PAD):受質為 Phenylalanine Phenylpyruvic acid (加 變綠色)。
- Urease test:受質為 Urea Ammonia (鹼性,變粉紅/紫紅色)。
- Decarboxylase test:受質為 Lysine/Ornithine/Arginine Amine (鹼性,變紫色)。
參考資料
- Indole Test- Principle, Media, Procedure, Types, Results, Uses - Microbe Notes
- Methyl Red (MR) Test- Principle, Procedure and Result Interpretation - MicrobiologyInfo.com
- Voges-Proskauer (VP) Test: Principle, Procedure & Results - Microbe Notes
- Kligler's Iron Agar Test - Procedure, Uses and Interpretation - MicrobiologyInfo.com